摘要:目的 比较人羊水来源c-kit+与c-kit-间充质干细胞的生物学特征及体外心肌分化能力。方法 通过常规产前诊断或自愿引产, 以羊膜腔穿刺术获取14份孕中期羊水（15～31周）, 通过流式细胞仪分选c-kit+间充质干细胞, 比较c-kit+干细胞与c-kit-干细胞的细胞形态及生长曲线。流式细胞仪及免疫细胞化学分析对两种细胞进行表型鉴定, 比较其体外向成骨、成脂及心肌样细胞诱导分化能力。RT-PCR和Weston blot检测相关基因及蛋白的表达。结果 14份羊水标本中, 有5份标本可以分选到c-kit+羊水干细胞, 分布在孕16～22周, 分选的细胞数量占贴壁细胞的(3.30±1.24)%。羊水干细胞以成纤维状为主, 可以稳定传代, 体外培养可增殖到50代以上。经过c-kit分选后, 细胞呈均匀一致的长纤维状, 排列规律。C-kit+及c-kit-羊水干细胞具有相似的生长曲线。两种细胞均具有间充质干细胞特征, 表达间充质干细胞标记（CD29, CD44, CD73, CD90, CD105）, 不表达造血细胞系标记（CD34, CD45）, 表达I类人类组织相容性抗原（HLA-ABC）, 不表达II类人类组织相容性抗原(HLA-DR)。Oct-4及SSEA-4胚胎干细胞标记在c-kit+干细胞的表达比率明显高于c-kit-干细胞。两种细胞在体外均可以向成脂细胞、成骨细胞分化。成脂细胞诱导后, 可以看到细胞内脂滴聚集, 油红O染色阳性。成骨细胞诱导后, 可以看到钙盐沉积, Von Kossa染色阳性。两种细胞分别与新生乳鼠心肌共培养, 体外向心肌细胞诱导, c-kit+羊水干细胞可以检测到GATA-4, α-actin, Cx43 和cTnT基因及蛋白的表达。而c-kit-干细胞在诱导后只表达GATA-4的基因及蛋白。结论 羊水来源c-kit+及c-kit-干细胞均表达间充质干细胞表型特征, 体外可以向成脂、成骨细胞分化。然而, c-kit+干细胞的心肌样细胞分化能力明显强于c-kit-干细胞, 可能与c-kit+干细胞具有某些胚胎干细胞特征有关。