摘要:目的 建立人醛糖还原酶(AR)及其与绿色荧光蛋白(GFP)融合表达的酿酒酵母细胞表达株, 检测细胞中目的基因的表达及蛋白活性。方法 将含目的基因AR及融合基因AR∷GFP的重组质粒pYEX-BX转化酵母细胞INVSc1, 得到宿主菌株XAR, XAG及对照菌株YEX。观察酵母细胞生长曲线及GFP荧光信号; Northern blot检测细胞中AR mRNA转录; Western blot检测AR蛋白表达; 荧光法测定AR活性。结果 三菌株生长速率无明显差异; XAG菌株相对荧光强度与生长时间成线性关系; XAR, XAG菌株分别有持续、稳定的目的基因mRNA转录及目的蛋白表达, 并具有AR活性。结论 成功构建了AR基因的酵母表达株, 为进一步将此细胞株应用于研究AR的致病机制及AR抑制剂的初步筛选打下基础。